甲基苯丙胺在成瘾与戒断大鼠体内分布比较

甲基苯丙胺成瘾戒断大鼠体内分布比较

摘要 目的比较甲基苯丙胺在成瘾与戒断后给药致死大鼠体内的分布情况。方法建立动物模型获得所需检材,经酸化水解后用环己烷提取,利用GC -MS全扫描定性分析,选择离子扫描定量分析。结果 甲基苯丙胺在成瘾组脾、肺、眼中的含量明显低于戒断组;成瘾组心、肝、肾、脑、肌肉、睾丸中含量略高于戒断组;成瘾组肝中含量最高,戒断组脾中含量最高。成瘾组含量依次为:肝,脾,肾>心,肺>脑,肌肉,睾丸>眼球;戒断组含量依次为:肝,脾,肺,肾>心>脑,肌肉,睾丸>眼球。结论 甲基苯丙胺在成瘾与戒断后给药致死大鼠体内的分布存在明显差异。

甲基苯丙胺( MAMP)俗称“冰毒”,属于苯丙胺类兴奋剂,是当前世界上广泛滥用毒品之一。关于甲基苯丙胺分布方面的研究近年也不少,但是还未看到有关甲基苯丙胺在成瘾与戒断后给药致死大鼠体内分布的研究。本文利用GC - MS方法,探究了MAMP在成瘾与戒断后给药致死大鼠体内的分布情况,为MAMP中毒死亡者的成瘾情况的判定提供数据支持,并为下一步开展MAMP代谢组学的研究提供可行性依据

1材料与方法

1.1 仪器与试剂

1.1.1 主要仪器

TRACE DSQ GC - MS( THERMO);超声(KQ - 100DV数控超声清洗器);离心(KUBOTA 2420);匀浆机( PR0 250)。

1.1.2材料与试剂

盐酸甲基苯丙胺、丙基解痉素( SKF525A)购于公安部物证鉴定中心、pH 10硼酸缓冲液、10% NaOH溶液、1 mol/L盐酸溶液、环己烷购于北京化工厂。

1.2试验方法

1.2.1 动物模型

建立动物模型,取250~300 g的SD雄性大鼠十四只,随机分成A、B两组,A组六只,B组八只。A组第一天腹腔注射5 mg/mL的MAMP O.4 mL一次,以后每天三次逐天递增分别腹腔注射 0.4、0.5、0.6 mL,B组八只给同体积的生理盐水。停药后每天用尿检检测直至呈阴性。然后,B组第一天腹腔注射5 mg/ mL的MAMP 0.4 mL -次,以后每天三次逐天递增分别腹腔注射0.4、0.5、 0.6 mL,A组给同体积生理盐水,第五天最后一次给药, A、B两组都给0.5 mL质量浓度为10 mg/mL的MAMP 致死。迅速解剖,取脏器组织在-40℃冰箱内保存。A 组为成瘾后戒断组(戒断组),B组为成瘾组。

1.2.2仪器条件

色谱条件

DB-5MS(30 mx0.25 mm x0.25 μm)毛细管柱,载气为高纯He2,恒流l mL/min;柱温:100℃ (l min) →10℃/min→280℃(1 min);传输线温度 270℃,进样口温度为260℃。分流比为10:1。

质谱条件

El电离源,电子能量70 eV,离子源温度250 c|C。倍增电压1371 V,发射电流100 μA。全扫描定性分析,开始扫描时间3 min,扫描范围40~ 200 amu。选择离子扫描定量分析,以m/z 58、91、134检测 MAMP,以m/z 86、99检测SKF525A。

1.2.3 样品处理与检验

取组织1 g,加1mL水,匀浆,再用1 mL去离子水冲洗,加10 μg SKF525A,再加3 mL的1 mol/L盐酸超声30 min,4 000 r/min离心5 min,取上清液,加氯化钠1 g,用10% NaOH调pH值为10,加0.5 mL 环己烷,震荡,4 000 r/min离心5 min,进样10 μL。

1.2.4工作曲线

取空白肝脏数份,添加不同浓度的MAMP,配制成浓度为0.1、0.2、0.5、1、5、25、100、200、300 g/g的样品,各加10 g SKF525A,按1.2.3的方法提取、测定。以药物浓度为横坐标,MAMP峰面积与 SKF525A峰面积之比为纵坐标进行线性回归

1.2.5 回收率及精密度试验

分别配制MAMP浓度为1、5、25 μg/g的肝脏数份,各加10μg SKF525A,按1.2.3的方法提取、测定。同一日内与不同日间各测三次,计算回收率及日内、日间精密度。

1.2.6检材处理

分别称取成瘾组与戒断组老鼠的心、肝、脾、肺、肾、肌肉、睾丸、脑、眼球各lg(不足1 g的按实 际质量记),各加10 μg SKF525A,按1.2.3的方法提取、测定。

3讨论

本文采用GC -MS法比较了MAMP在大剂量致死的成瘾组大鼠与戒断组大鼠体内的分布情况。由 结果可知,MAMP在成瘾组脾、肺、眼中的含量明显低于戒断组;成瘾组心、肝、肾、脑、肌肉睾丸中含量略高于戒断组;成瘾组肝中含量最高,对照组脾中含量最高。成瘾组含量依次为:肝,脾,肾>心,肺> 脑,肌肉,睾丸>眼球;戒断组含量依次为:肝,脾,肺,肾>心>脑,肌肉,睾丸>眼球。